摘要:通过研究温肾活血通脉片对心肌梗死面积、冠脉血流量等方面的影响,了解温肾活血通脉片对急性心肌缺血犬的保护作用。方法:犬随机分为温肾活血通脉片(WSHX组)高、中、低三个剂量组,复方丹参滴丸组(FFDS组)等。通过结扎麻醉犬冠状动脉左前降支复制急性心肌缺血模型,计算心肌梗死面积,观测冠脉血流量等指标。结论:温肾活血通脉片(WSHX)对犬急性心肌缺血具有明显的保护作用,其机制可能是通过平衡心肌供氧与需氧,改善心肌代谢,保护受损心肌细胞等多种途径实现的。
关键词:温肾活血通脉片;急性心肌缺血;犬
中图分类号:R54 文献标识码:A 文章编号:(2008)04-0103-03
在现代社会中,心肌缺血性疾病已成为危及人类健康和生命的常见病和多发病。药物治疗目前仍是防治缺血性心脏病的重要途径。因此,寻找治疗心肌缺血性疾病的药物是目前亟待探讨的课题。缺血性心肌损伤其中最常见的为冠状动脉粥样硬化引起的急性心肌缺血、缺氧。本研究之复方由肉桂、西洋参、酒丹参、酒香附、三七等药组成,其主要功效为温肾调肝,化痰散结。实验采用结扎犬左冠状动脉前降支制备急性心肌缺血模型,从电生理学、酶学、定量组织学等方面来探讨温肾活血通脉片对犬急性心肌缺血性损伤的保护作用及机制。
一、材料与方法
1 材料
(1)药品与试剂 温肾活血通脉片: (组成:肉桂6g,酒丹参30g,三七10g,薤白10g,水蛭9g,西洋参15g,酒香附15g,苏合香3g,甘草3g)每片成药称重0.4g,1g成药含生药4.9g。批号:20070816,由湖南中医药大学附属第一医院药剂科提供;复方丹参滴丸:(组成:丹参,三七,冰片)每丸成药称重27mg。批号:20071017,由天津天士力制药股份有限公司出品;戊巴比妥钠:批号:070402,由北京化学公司提供;硝基四氮唑蓝:批号:070124,由上海丽珠东风生物有限公司提供;CK试剂盒:批号:20070905,由北京中山生物技术有限公司提供;0.9%生理盐水;批号:070818402,由长春修正药业有限公司提供。
(2)主要仪器 SC-3型呼吸机(上海);开胸器(上海);16道生理记录仪(MP150)(美国);Es—60J电子分析天平(沈阳)。
(3)实验动物健康杂种犬,雌雄兼用,体重12.5~14kg,湖南中医药大学实验动物中心提供。
2 实验方法
将30只健康杂种犬按随机数字表法随机分为6组,每组5只,分别为:模型组:每只犬给予等容量的生理盐水;复方丹参滴丸组(FFDS组):每丸27mg,给药0.02g/kg(相当于临床用量的1倍),溶于0.9%生理盐水中,每只犬给药100ml;温肾活血通脉片低剂量组(WSHX低剂量组);成药每片0.4g,给药0.24g(成药)/kg(相当于临床用量的1倍),溶于0.9%生理盐水中,每只犬给药100ml;温肾活血通脉片中剂量组(WSHX中剂量组):成药每片0.4g,给药0.48g(成药)/kg(相当于临床用量的2倍),溶于0.9%生理盐水中,每只犬给药100ml;温肾活血通脉片高剂量组(WSHX高剂量组):成药每片0.4g,给药0.96g(成药),kg(相当于临床用量的4倍),溶于0.9%生理盐水中,每只犬给药100ml;空白组:不施加任何处理因素。动物前肢静脉注射3%的戊巴比妥钠1mL·kg-1进行麻醉,分离右侧股静脉,补充体液。分离出十二指肠,将聚乙烯塑料管插入肠内腔,并外科荷包缝合固定,以备肠腔内给药。切开颈部皮肤,分离气管以备开胸后连接电动呼吸机行人工呼吸。使麻醉犬右侧卧位,切开皮肤,行气管插管,开动人工呼吸机(16—18次/min)维持正常通气。测定心脏冠脉血流量(CBF);分离冠状动脉前降支中下1/3段,穿线备结扎以造成急性实验性心肌缺血模型;缝置24点固定式心外膜电极,连接16道生理记录仪(MP150),描记心外膜电图,描记前用生理盐水湿润心脏表面,以ST段抬高≥2mv的导联数(N—sT)表示心肌缺血范围,以ST段升高总mv数(∑—sT)表示心肌缺血程度。建立急性心肌缺血模型。
造模后30min记录各项指标(CBF、N—sT、∑—ST)作为给药前对照值,于药后15、30、45、60、90、120、180min各时间点记录各项指标。给药后180分钟,股静脉取血5mL,离心5min(2500dmin),取血清测肌酸磷酸激酶(CK)的活性。以上操作结束后,将左心室均匀地横断切成5—6片,置于硝基四氮唑兰(N—BT)染液中,在37℃恒温水浴箱中染色15分钟后,结果显示:梗死区不着色,非梗死区被NBT染为蓝色。
